株洲日报·掌上株洲记者/刘琼
通讯员/朱卫健
“为什么核酸检测不能随到随测?”“昨天做的核酸检测,怎么还没出结果?”……随着近段时间疫情形势逐渐严峻,接受核酸检测的市民增多的同时,不少人也因此生出一些疑问。
核酸检测的流程到底是怎样?4月1日,记者采访了市临床检验质量控制中心主任、市中心医院医技科主任顾敏。
“核酸检测,实际上采样只是第一步。”顾敏表示,采样完后,核酸检测的流程大致还需要经历7个步骤。
第一步:标本采集
采样人员需要佩戴N95口罩、护目镜(或面屏)、隔离衣、防护服、双层乳胶手套、防水靴套等全套防护措施,采集完受检者的鼻咽拭子后,采样人员将拭子头浸入含病毒保存液的管中。
被检者的准备和配合、正确地采集标本对检测结果至关重要,如果咽拭子样本质量不高,则很可能会造成假阴性。采集完的标本要迅速放入样本保存管中,保存管内保存液同时还具有灭活病毒的作用。
第二步:标本转运
核酸采集点和检测点不会在同一处,无法采一个送一个,而是隔一段时间批量转运一次标本,转运车辆和人员的调度,运送路途等因素,都需要时间。
为何不能在采样点进行检测?顾敏解释,核酸检测是极其灵敏且精密的实验,对环境要求很高,新冠肺炎病毒传染能力非常强,因此核酸检测需要在相应等级的生物安全实验室中进行,以防实验过程中发生病原感染和泄露等事故,不是随便开辟个地方就能做检测的。
第三步:标本签收及录入
标本放置在专用转运箱里被护送到实验室,开箱前须用75%乙醇喷雾消毒;同时检查样本的密闭性,确认样本完好无异常,且样本是密封于标本密封袋内,并贴有标识(被检者姓名、样本种类、编号及采样时间),无外漏。 标本接收人员的个人防护,需按采样人员防护装备执行。标本运送人员和接收人员对标本进行双签收,再人工录入信息系统,在大量标本蜂拥而至的情况下,必须做到零错误率。
顾敏强调,这个步骤需要工作人员一个一个拆包装,需做好生物安全防护,且拆包装仅为众多步骤中的一小步。扫描条码录入系统、编号都属于全手工操作。在海量标本的情况下,工作人员还需做到零差错,杜绝张冠李戴或者标本遗漏现象。
第四步:提取核酸
标本到了实验室,并非就能直接用于检测,需要对标本进行震荡混匀,使样本管内核酸均匀分布。然后,检验人员再将标本里的核酸提取出来,才能进行扩增和判读。
面对海量标本,检验人员要一个个拧开盖子,一个个用加样枪吸取标本进行核酸提取。虽然操作不算很繁琐,但要保证每个动作精准到位,不出差错,防止交叉污染。工作人员需精神高度集中,如果在酷暑天,他们从上到下,穿戴全套防护装备,不仅给操作带来不便,甚至会全身湿透。
第五步:配制试剂
检验人员必须保证零污染,精确操作,多少份标本就需要配置多少份扩增试剂,需要多少份EP试管。又是无数个枪头的工作量,全手工分装,还要做好保护,不能污染,一旦污染就前功尽弃,从头再来。
第六步:加样
提取完成的核酸样本,加入扩增用的反应液中,仍是全手工操作,需全神贯注不能有丝毫闪失,以免搞混淆。提取好的核酸,需加入5微升进入试剂体系进行扩增。
5微升是什么概念?顾敏说,即一滴水的十分之一(20滴水约1毫升)。这意味着,工作人员要用极小的枪头只能看到头上那一点点,且要求操作过程快、稳、准。
第七步:上机扩增
将所有提取好的核酸,加入扩增反应液后放入扩增仪中,选好相应程序就可以开始扩增程序了。这个过程就需要1.5—2小时,而且仪器一旦启动扩增程序,是不能停下来中途添加新的标本的,必须等这一批结果扩增完成后,才能进行下一批标本的扩增。因此,这也是核酸检测为什么不能随到随测的原因之一。
顾敏介绍,除上述之外,在进行每一次检测时,工作人员需加入相应的各种阴性对照、弱阳性对照、阳性对照、环境质控、生理盐水对照等,用以监测此次实验全过程的质量,确保检测结果的可靠及准确。实验过程太多步骤,存在太多潜在的干扰因素,需每批次都要采取同样的措施来确保检测质量。且一批次实验做完后,还需要对生物安全柜、实验室台面及空气进行消毒,才能进行下一批次实验。
检测结果出来后,需要审核结果、核对标本信息、结果发放、数据传输等。理论上,一次核酸检测周期至少需4—6个小时才能出结果,检测报告需在12—24小时对外发放(在线平台查询)。如果遇到大量标本涌来,所有配套物资和工作量都对应增长,出检测结果的时间也会相应延长。